Última alteração: 2012-11-12
Resumo
Introdução: O avanço na área de materiais biomédicos permitiu o desenvolvimento de arcabouços para o desenvolvimento celular que simulam as condições fisiológicas dos tecidos a serem regenerados, a fim de propiciarem às células um ambiente para aderirem, proliferarem e se diferenciarem. O ácido hialurônico, por ser biocompátivel, biodegradável e possuir um nível alto de intumescimento, é um material adequado para ser utilizado no reparo ou regeneração de tecidos.
Objetivos: O objetivo deste estudo foi a caracterização da interação celular com hidrogel de ácido hialurônico.
Metodologia: Foi sintetizado um hidrogel de ácido hialurônico por meio de reticulação química, usando agente reticulador dihidrazida adípica (ADH), com diminuição do pH da solução, utilizando ácido clorídrico (HCl). Foi realizado ensaio de intumescimento do biomaterial, em solução fisiológica, a intervalos de 10, 20, 30 minutos e 24 horas. Os ensaios foram realizados em triplicata. Posteriormente foi realizada a cultura de células Vero sobre o material. As células foram mantidas em meio 199, com 10 % de SFB, a 37 oC com 5% de CO2. Foi realizado ensaio de inoculação das células sobre o biomaterial seco, e o ensaio de citotoxicidade indireta do biomaterial. O extrato do biomaterial foi obtido com incubação me meio de cultura durante 24 horas. As células foram analisadas após 24 horas de contato com o extrato do biomaterial. O teste foi realizado em triplicata, e foram utilizados controles citotóxicos e não citotóxicos.
Resultados: O método de preparo biomaterial foi eficiente, tendo sido obtida uma reticulação adequada do hidrogel. O hidrogel de ácido hialurônico apresentou intumescimento importante em solução fisiológica, correspondente a uma variação total de massa superior a 200%, em relação a sua massa seca, após o período de 24horas. Os ensaios de inoculação celular sobre o biomaterial demonstraram a possibilidade de intumescimento dos hidrogéis de ácido hialurônico diretamente na presença de uma suspensão celular, resultando em uma distribuição homogênea de células na superfície do hidrogel. No entanto a morfologia das células não se manteve característica ao longo dos primeiros 5 dias em cultura. O ensaio de citotoxicidade indireta constatou o efeito citotóxico do hidrogel de ácido hialurônico sobre as células Vero.
Conclusão: O hidrogel de ácido hialurônico, reticulado na presença de dihidrazida adípica (ADH), apresentou um padrão de intumescimento adequado para a inoculação celular. No entanto as condições de reticulação e lavagem do hidrogel devem ser revisadas para evitar o efeito citotóxico observado.