Sistema de Submissão de Resumos, II ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA - 2012 (ENCERRADO)

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Estudo da Variação do pH na Incorporação do Citocromo c em Sílica Mesoporosa SBA-15 e sua Atividade Catalítica no Mecanismo de Oxidação de Fenol
Mariana V. Lobo, Iseli Lourenço Nantes, Midilane Sena, Midilane Sena, Midilane Sena

Última alteração: 2012-11-13

Resumo


O termo citocromo significa “pigmento celular” e se refere a proteínas dacadeia respiratória de todos os seres vivos. Particularmente, citocromo c era reconhecidopelo papel na respiração celular como transportador de elétrons na cadeia respiratóriaque libera energia para a síntese de ATP. Nesse processo, o ferro do grupo prostéticoheme recicla entre os estados de oxidação (II) e (III). Além disso, o citocromo c, sobestímulo apoptótico, é liberado no citosol onde incorpora-se ao apoptossomo e participada ativação das caspases que atuam na morte celular. Os citocromos possuem típicos espectros de absorção UV-visível com máximos de absorção nas regiões de 400 e 500 nm. ASBA-15 é uma sílica mesoporosa com estrutura hexagonal de elevada área superficial comporos grandes. Essa sílica têm sido estudada para a introdução de alguns fármacos,principalmente radiofármacos, usados em tratamentos contra o câncer, pois podem liberaras drogas no local correto (células carcinogênicas), causando menos danos aos pacientes. Incorporar o citocromo c nos poros da sílica mesoporosa SBA–15 em váriosvalores de pH e observar a influência do pH na taxa de incorporação. Investigar aestrutura e ação biológica do citocromo c incorporado pela adição a meio de culturacelular. Para a incorporação foi medido um volume de 15 mL de tampãouniversal, 5 mM (pH: 5; 6; 7; 8; 8,5; 9; 9,5; 10; 10,5; 11 e 12). A esse tampão foiadicionado o citocromo c (58 µM) e a solução foi lida no espectrofotômetro UV-vis. Após aleitura, foi adicionada a SBA-15 (15 mg). As suspensões foram agitadas por 24h ecentrifugadas. Os sobrenadantes foram retirados e guardados para posterior leitura. Osprecipitados foram lavados mais duas vezes nos tampões correspondentes, sendo que emcada lavagem, as suspensões foram agitadas por 3h e centrifugadas, guardando sempre osobrenadante. Os espectros foram lidos e salvos em um espectrofotômetro Varian Carry 50UV-visible, na região de 200 a 800 nm. Para verificar se a atividade catalítica da proteínase manteve após a incorporação, testamos o sistema com peróxidos orgânico (tert-Butil) e inorgânico (H2O2) e fenol. A incorporação do citocromo c foi favorecida empH alcalino. Após incorporação do citocromo houve aumento de turbidez da suspensão e aproteína apresentou atividade catalítica de oxidação sobre moléculas orgânicas como ofenol. Na etapa seguinte testaremos outros substratos para oxidação, a ativação decaspases e por fim a ação em células. A incorporação de citocromo c em SBA-15 parece formar um sistema estável e dotado de atividade catalítica com característicaspromissoras para ação biológica.